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Octet® AHC2 生物傳感器

96 個涂有抗人 IgG 的生物傳感器托盤，用于對人 IgG 和 IgG 衍生的 Fc 融合蛋白進行定量和動力學分析。5 托盤包裝包括每托盤 10% 的折扣；20 盤盒包括每盤 20% 的折扣

用于含有人類 fc 區(qū)蛋白質(zhì)的定量和動力學角色塑造的 Octet AHC2生物傳感器

關(guān)鍵特征-含有粗制和純化的人類 Fc 區(qū)域蛋白質(zhì)的快速定量和動力學分析。改進生物傳感器表面配體負載能力，提高動力學測定靈敏度，增加定量測定的動態(tài)范圍。- 為多種動力學或定量測量進行高效率和成本效益高的生物傳感器再生。

概述 Octet AHC2生物傳感器是下一代抗人 IgG Fc 捕獲生物傳感器，通過啟用人類 IgG 抗體和 IgG 衍生的 Fc 融合蛋白的定量和動力學角色塑造，提供顯著改善的性能以及增加的通用性。此外，對于動力學和定量應(yīng)用，Octet AHC2生物傳感器可以高效和低成本地再生10-20次，這使得它們成為廣泛的高通量應(yīng)用的非常有用的解決方案，包括鉛鑒定和優(yōu)化，細胞系開發(fā)，工藝開發(fā)和 QC。

動力學測定工作流程 Octet AHC2生物傳感器用新的抗人 Fc 特異性抗體預(yù)固定，其能夠直接從粗糙或純化的基質(zhì)中捕獲人 IgG 和含人 Fc 區(qū)域的蛋白質(zhì)。與上一代 AHC 生物傳感器相比，它們提供了高達2倍的人 IgG 和含有 Fc 區(qū)域的蛋白質(zhì)的結(jié)合能力，因此使得它們特別適合于高靈敏度的動力學測定，例如較小蛋白質(zhì)的表征。圖1中概述了一個利用 Octet AHC2生物傳感器來表征分析物與人 IgG 之間相互作用的實例測定工作流程。圖1: 人類 IgG 和分析物之間的相互作用的動力學角色塑造，使用的是 Octet AHC2生物傳感器。(A)描述典型步驟的動力學分析工作流程: 1。平衡(基線) ，2。負載(捕獲) hIgG，3。基線4。聯(lián)合動力學，5。解離動力學解離動力學。(B)八重奏平臺上配體 hIgG 與分析物 Fab 片段，山羊抗 hIgG (H + L)特異性(50kDa)之間相互作用的動力學分析。結(jié)合和解離痕跡符合1:1結(jié)合模型。動力學結(jié)果見表1。表1: 使用 Octet AHC2生物傳感器進行配體 hIgG 和分析物 Fab 片段，山羊抗 hIgG (H + L)特異性(50kDa)之間相互作用的動力學結(jié)果，數(shù)據(jù)如圖1B 所示。

定量分析工作流程八聚體 AHC2生物傳感器根據(jù)蛋白質(zhì)的 Fc 區(qū)與生物傳感器表面結(jié)合的速率來確定抗體濃度。更具體地說，定量是通過將結(jié)合速率與標準校準曲線的結(jié)合速率進行比較來實現(xiàn)的，標準校準曲線是由具有已知濃度的相同的含有 Fc 的人蛋白質(zhì)樣品構(gòu)建的。Octet AHC2生物傳感器對所有四種 hIgG 亞類具有高度特異性，并且可以用于定量粗制和純化的 hIgG，濃度范圍為0.1 -2,000 μg/mL，取決于測定條件。確定的 IgG 濃度與使用正交技術(shù)(如 HPLC)產(chǎn)生的結(jié)果相關(guān)性良好。使用 Octet AHC2生物傳感器產(chǎn)生的 hIgG 定量結(jié)果的示例如圖2所示。圖2: 使用 Octet AHC2生物傳感器定量 hIgG。(A)0.5 -2,000 μg/mL 動態(tài)范圍內(nèi)的濃度的 hIgG 劑量反應(yīng)。(B)使用5PL (加權(quán) Y2)擬合模型計算 hIgG 標準校準曲線。

通過標準的低 pH 方案，八聚體 AHC2生物傳感器可以在動力學和定量測定中再生10-20個循環(huán)，最短時間為2分鐘。再生允許生物傳感器的重復使用，并提供了一個節(jié)省成本的解決方案來產(chǎn)生配體-分析物對的重復數(shù)據(jù)，或分析大量樣品的順序。具有10個再生周期的定量測定實例如圖3和表2所示。

圖3: 使用10mM 甘氨酸，pH1.7.3應(yīng)用范圍 Octet AHC2生物傳感器為廣泛的應(yīng)用提供了一個靈活的平臺，從分析動力學(kon，koff 和 KD)或在含有人類 Fc 的蛋白質(zhì)及其分析物之間進行表位分選，到在純化的和粗蛋白質(zhì)樣品(例如上清液和血清)中定量含有人類 Fc 的蛋白質(zhì)。

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